SpectralFLIM
平行16-PMT光谱FastFLIM
平行16-PMT光谱FastFLIM
Overview of Zeiss
Zeiss的LSM 710、LSM 770、LSM 880 和 LSM 980共焦显微镜可以用光子计数探测轻松升级，拥有荧光寿命成像 (FLIM) 和荧光相关光谱 (FCS) 功能。数据是用以下两个模式中的一个采集的：FastFLIM (数字频域) 或是SWISS卡 (数字TCSPC，时域)。尽管模式的选择取决于用户的喜好，FastFLIM直接提供了适用于相位图分析的数据格式。该套装还包括了VistaVision，用于数据收集及处理。
Zeiss FCS和FLIM升级包包括以下物品
| FastFLIM单元或TCSPC单元 | 每一个单元接受来自探测器的输出信号 (通过BNC) 和来自奥林巴斯共焦顶部的同步信号。 |
|---|---|
| 探测器 | 连接到LSM显微镜解扫描端口共焦顶部的2-探测器，或是连接到非解扫描端口 (多光子仪器)。 |
| 激光发射器 (对于多光子系统来说不是必须的) |
可用于3-、4-和6-激光器。激光光束被叠加，并且激光发射器的输出通过光纤被连接到显微镜。 |
| 由ISS提供电脑运行的VistaVision | 高性能电脑，32 GB RAM，带有32”平板显示器，分辨率2556 x 1440 |
Product Specifications for Zeiss
采集和分析软件
- ISS的VistaVision
荧光波动光谱 (FFS) 测量
- 荧光相关光谱 (自相关和互相关)
- 光子计数直方图 (PCH)
- 图像中位于目标XYZ位置的FFS测量
- FLCS，荧光寿命相关光谱
- 数量与亮度 (N&B)
成像模块测量
- 单点 (强度、偏振、寿命)
- 单个平面和z堆栈 (偏振图像、比例法、FLIM)
FLIM图像 (数字频域) (单平面和z堆栈)
- 通过数字频域 (DFD) 获得。 该程式同时获取FLIM图像和稳态图像。
FLIM图像时域 (单平面和z堆栈)
- 在时间相关单光子计数 (TCSPC) 中获得
单分子模块
- 突发分析
- FRET和相关方法
- PIE-FRET方法
光源
- 激光二极管：370, 405, 440, 473, 488, 635 nm
- 单光子激光脉冲激光器
- 多光子激光器
激光发射器
- 3、4、6激光二极管的模型。光通过单模式光纤被送至显微镜。
输入通道
- 2个
探测器
- GaAs PMT (型号H7422P)
- 混合型PMT (型号R10467U)
CLK
- 像素，行，帧
FLIM图像数据采集最小滞留时间
- 6 µs/像素
单元控制
- USB
电脑
- 高性能处理器，32GB RAM，Windows 11，64比特
- 32"显示器，2556 x 1440分辨率
Zeiss的配置示例
Zeiss的产品配件
产品资源
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“Millisecond spatiotemporal dynamics of FRET biosensors by the pair correlation function and the phasor approach to FLIM.” Hinde, E., Digman, M.A., Hahn, K.M. & Gratton, E. Proceedings of the National Academy of Sciences, 110(1), pp. 135–140, 2012, Dec. doi: 10.1073/pnas.1211882110. -
“Metabolic trajectory of cellular differentiation in small intestine by Phasor Fluorescence Lifetime Microscopy of NADH.” Stringari, C., Edwards, R.A., Pate, K.T., Waterman, M.L., Donovan, P.J. & Gratton, E. Scientific Reports, 2(1), 2012, Aug. doi: 10.1038/srep00568.
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“Label-free separation of human embryonic stem cells and their differentiating progenies by phasor fluorescence lifetime microscopy.” Stringari, C. Journal of Biomedical Optics, 17(4), p. 046012, 2012, Apr. doi: 10.1117/1.jbo.17.4.046012.
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“Biosensor Förster resonance energy transfer detection by the phasor approach to fluorescence lifetime imaging microscopy.” Hinde, E., Digman, M.A., Welch, C., Hahn, K.M. & Gratton, E. Microscopy Research and Technique, 75(3), pp. 271–281, 2011, Aug. doi: 10.1002/jemt.21054.
