Alba STEDFLIM/FFS激光扫描显微镜触手可及的超分辨率!

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Overview of Alba STED

受激发射损耗 (STED) 是一种强大的超分辨率显微技术,使用户能够以低于衍射极限的空间分辨率观察荧光结构。Alba STED通过使用脉冲激发和脉冲损耗 (pSTED) 实现60 - 100 nm的横向分辨率。通过使用FastFLIM (数字频域寿命成像) 和相位图采集到的寿命信息,分辨率可以被进一步地增加:只被激发激光激活的荧光团所发射的光子 (固有的荧光衰减) 与被STED激光部分或全部激活的荧光团所发射的光子 (拥有更短的衰减时) 被有效地分离。在标准的样品上测量得出的分辨率为30 nm。此外,通过相位图结合pSTED和寿命分析能够分离两个拥有相似发射方式却有不同衰减时的荧光团 (双标记发射)。

Alba STED的关键特征

上至60万次/秒的高动态范围

高动态范围

FastFLIM中的速度和精度

快速图像采集

(驻留时间: 0.2 µs)

FastFLIM中的脉冲激发和脉冲STED

pSTED

(脉冲激发和脉冲STED)
用于时间分辨采集的FastFLIM

使用寿命信息和相位图的改进后图像分辨率

改进的图像分辨率以及相位图

相位图上的双标记激发

双标记激发

数据相当清晰!

Confocal image of actin in neurons共焦
pSTED image of actin in neuronspSTED
神经元细胞中被SiR标记的肌动蛋白
(由伊利诺伊大学厄巴纳香槟分校的Paul Selvin博士提供)
Confocal image of mitochondria in HeLa cells共焦
pSTED image of mitochondria in HeLa cellspSTED
由Atto647N标记的海拉细胞中的线粒体
(由伊利诺伊大学厄巴纳香槟分校的Paul Selvin博士提供)
Confocal image of microtubule in HeLa cell共焦
pSTED image of microtubule in HeLa cellpSTED
由SiR标记的活体海拉细胞细胞微管
(由伊利诺伊大学厄巴纳香槟分校的Paul Selvin博士提供)
Confocal image of HSV1共焦
pSTED image of HSV1pSTED
HSV1 GFP Atto647N
(由伊利诺伊大学厄巴纳香槟分校Alex Evilevitch博士)
Confocal image of nucleus pores in COS-7 cells共焦
pSTED image of nucleus pores in COS-7 cellspSTED
用anti-NUP STAR635P染料染色的COS-7细胞核孔

Product Specifications for Alba STED

仪器特点
  • 每个采集通道上都有单独的针孔
  • 通过电脑操控对针孔可变小孔的选择
  • 通过电脑操控成像平面上针孔的位置
  • 单光子或多光子激发
  • 上至四个通道的数据采集
  • 摄像头的辅助接口
显微镜与耦合
  • 奥林巴斯、尼康、Zeiss
  • 倒置和正置
  • 左侧端口和后部端口
STED激光器1
  • 脉冲,775 ± 2 nm
  • 平均输出功率:1.2 W at 80 MHz
  • 脉冲宽度:700 ± 200 ps
  • 重复率:20 - 80 MHz
  • 光束质量 (TEM00): M2 < 1.3
或是STED激光器2
  • 脉冲592 ± 2 nm
  • 平均输出电源1.2 W at 80 MHz
  • 脉冲宽度:700 ± 200 ps
  • 重复率:20 - 80 MHz
  • 光束质量 (TEM00): M2 < 1.3
激发激光器
  • 脉冲,640 nm
  • 脉冲宽度 (处于中间功率时): 40 - 90 ps
  • 重复率:从500 KHz到100 MHz
  • 功率 (位于40 MHz处):上至4 mW
额外的激光器
  • 激光发射器外壳中的单光子激光器,激光强度和快门可用电脑操控
激光发射器
  • 3、4、6激光器的模型。光通过单模式光纤被送至显微镜。
检流计扫描仪
  • 两个镀银检流计扫描镜
  • 清晰的光学表面:5 mm
  • 最大扫描率:1 KHz
  • 扫描分辨率:64 x 64 to 4096 x 4096 pixels
  • 扫描模式:Pt, Xt, XZ, XY, XZt, XYt, XYZ
  • ROI扫描:长方形、椭圆、多边形、线
位置控制**
  • ISS 3轴控制单元
  • ISS XY振镜控制单元
  • ISS Z-压电控制单元
  • 显微镜内置聚焦控制模块
  • 自动化XY位移台 (ASI, Prior)
  • XYZ压电台 (MadCity, PI)
针孔
  • 单个、孔径可变针孔;从20 µm至1000 µm的直径
探测器
  • 冷却GaAsP和GaAs PMT
  • 冷却混合型PMTs
  • SPADs
二向色滤光片
  • 用于单光子激发:1,2,3带滤光片
  • 用于多光子激发
偏振器
  • 立方体分束器,波长范围:450 - 1100 nm; 消光比:位于±3 度处为10,000:1
数据采集单元
  • FastFLIM (数字频域FLIM)
软件
  • VistaVision
电脑和显示屏
  • 高性能处理器,32 GB RAM,Windows 11,64比特
  • 32"显示屏,2556 x 1440分辨率
电源要求
  • 通用电源输入:110 - 240 V, 50/60 Hz, 400 VAC
大小
  • 885 mm (长) x 600 mm (宽) x 330 mm (高)
重量 (kg)
  • 40 (除去显微镜)

Alba STED的测量

强度和寿命成像
  • 1p或2p共焦图像
  • 频域或TCSPC的FLIM
  • 磷光寿命成像 (PLIM)
  • 偏振图像
稳态和时间解析偏振各向异性成像
 
荧光波动光谱 (FFS)
  • 荧光相关光谱 (FCS)
  • 荧光互相关光谱 (FCCS)
  • 光子计数直方图 (PCH)
  • 荧光寿命相关光谱 (FLCS)
  • 扫描FCS
  • 数量和亮度 (N&B)
  • 光栅成像相关光谱 (RICS)
粒子追踪 (自选的)
  • 分子轨迹的3D重建
超分辨率
  • 脉冲STED
单分子FRET突发分析
  • 突发分析
  • FRET和相关方法
  • PIE-FRET方法
反聚束
 

Alba STED的配置示例

Alba STED示意图

Alba STED的产品配件

更多产品选择

  • 灌注系统可稳定条件
    灌注系统

    这款蠕动泵为滑台上保持样本状态 (温度、pH等等) 提供了解决方案。

  • 防止样本变干的灌溉系统
    灌溉系统

    当使用水物镜进行长时间测量时,它可以防止液体变干。

  • 自动维持焦距
    自动对焦保持

    它通过使用主动反馈防止漂移,让物镜的焦点位置保持数个小时。

  • 为细胞培养维持环境条件
    样本温度控制

    滑台顶部的培养箱或是一个完整的外壳可以用于维持细胞培养的环境条件。

  • 落射荧光灯
    落射荧光灯

    您可以通过Epi模块将您的样本可视化。请选择弧光灯或 LED 作为光源以及合适的滤光片立方体以添加到显微镜盒中。

  • 与原子力显微镜连接
    原子力显微镜 (AFM)

    与以下型号完全集成:
    JPK-Bruker的NanoWizard
    Bruker的Resolve
    对于其他型号,请联系ISS。

Alba STED的产品软件

显示VistaVision的截屏

VistaVision

VistaVision是一款用于共焦显微镜应用的完整软件包,其中包括仪器控制、数据采集和数据处理。它易于使用,该软件易于使用,通过模块化组件开发,可在特定仪器配置被选择时激活。模块包括:

  • FLIM/PLIM成像
  • FFS
  • smFRET
  • 粒子追踪
了解更多

产品资源